Đặt hàng primer(mồi) ở đâu?
Đặt hàng primer hay đoạn mồi ở đâu? thời gian đặt primer là bao lâu? Đặt primer ở đâu chất lượng?
Trước tiên cùng tìm hiểu đoạn mồi là gì?
Primer hay đoạn mội là một sợi nucleic acid (hoặc ribonucleic acid) dùng để làm đoạn mồi đúng như cái tên của nó, mồi khởi đầu cho quá trình nhân đôi(replication) của DNA. Hầu hết các enzyme xúc tác quá trình nhân đôi( DNA polymerase ) phải cần primer để bắt đầu tổng hợp một đoạn DNA mới. Vì nó chỉ gắn các nucleotide vào sợi primer có sẵn theo nguyên tắc bổ sung với sợi khuôn.
Hướng dẫn pha loãng primer
Bình thường thì các đoạn primer hoặc probe được nhà sản xuất cung cấp ở dạng đông khô và cần phải pha ra mới sử dụng được, thường pha với nước hoặc các dung dịch đệm.
Các primer thường pha ra ở nồng độ 100 µM hoặc 100 pmol/µl; đó là nồng độ stock. Cần pha loãng ra nồng độ thông thường đó là 10 µM, hoặc nồng độ tùy chỉnh theo quy trình của master mix.
Cần xem trên nhãn của ống primer số nmol là bao nhiêu, rồi đem nhân cho 10, kết quả thu được chính là thể tích (µl) nước hoặc dung dịch đệm sử dụng cho hoàn nguyên primer/probe để đạt được nồng độ là 100 µM.
Ví dụ như trên nhãn ống primer là 30.0 nmol thì lúc này mình chỉ cần bổ sung thêm 300 µl nước hoặc dung dịch đệm. Nồng độ ống primer lúc này là 100 µM.
Các bước pha loãng primer như sau
- Cho vào máy ly tâm ở 5000 vòng/phút trong 1-2 phút để các chất trên nắp hoặc thành ống kéo xuống bên dưới đáy ống primer.
- Bổ sung thể tích nước hoặc dung dịch đệm đúng theo thể tích đã hướng dẫn tính toán ở trên (thể tích = 10 x số nmol). Dung dịch đệm TE 1X (10 mM Tris và 1 mM EDTA) sẽ được đề xuất sử dụng để giúp bảo quản primer/probe được lâu hơn.
- Tiếp theo đem đi vortex đề hòa tan viên đông khô, rồi đem đi ủ ở 55oC trong 1-5 phút cho nó tan ra hết.
- Chia nhỏ primer/probe vào các ống(tube) 1,5ml. Thể tích chia nhỏ phụ thuộc vào số lượng phản ứng sử dụng, có thể chia nhỏ khoảng 20µl hoặc nhiều hơn.
- Những tube này bảo quản ở -20oC sẽ lưu trữ được lâu ( 1 năm)
Công thức pha loãng về nồng độ sử dụng
Công thức sử dụng :C1 x V1 = C2 x V2
Ví dụ: Nồng độ ban đầu là C1 (10 µM), V1 là thể tích ống gốc cần hút. C2 là nồng độ sử dụng (ví dụ 1 µM), V2 là thể tích của ống sử dụng cần pha (ví dụ 50 µL). Do đó, V1= (1*50)/10 = 5 µL
Do đó, chúng ta cần hút 5 µl của ống gốc nồng độ 10 µM và bổ sung thêm 45 µl nước để được ống nồng độ sử dụng 1 µM có thể tích 50 µl.
Thời gian đặt hàng primer
Chúng tôi sẽ ghép các đơn hàng nhỏ theo yêu cầu của khách hàng. Khi đủ số lượng sẽ tiến hành gửi đơn qua hãng để tổng hợp theo trình tự của khách hàng đưa ra. Thời gian đặt hàng thông thường từ 4-6 tuần.
Acid mạnh nhất Thế giới (Fluoroantimonic acid)
Acid mạnh nhất Thế giới Fluoroantimonic acid ( hãng […]
Th1
[Thuyết minh] Cuộc chiến kinh hoàng giữa bầy kiến và tổ mối
Cuộc chiến nãy lửa giữa bầy kiến và đàn […]
Th3
Thuốc chống trầm cảm ra đời như thế nào?
Video: Thuốc chống trầm cảm tình cờ được phát hiện vào năm 1950, nó đã […]
Th9
Những đôi mắt tinh tường nhất trong Thế giới động vật
Trong Thế giới động vật, có nhiều loại với đôi mắt rất tinh tường, độc […]
Th1
Cận cảnh Coronavirus
Nhìn cận cảnh virus sẽ giúp chúng ta hiểu được nó. Các hình ảnh của […]
Th12
[Thuyết minh] Cuộc chiến kinh hoàng giữa bầy kiến và tổ mối
Cuộc chiến nãy lửa giữa bầy kiến và đàn mối trong khu rừng nhiệt đới […]
Th3
Ngỗng con sống sót sau khi nhảy từ vách đá 122m
Ngỗng Barnacle sau khi nở vài ngày phải nhảy từ những vách đá cao xuống […]
Th1
Bầy tinh tinh “quánh nhau” tranh giành quyền giao phối
Mặc dù nổ lực đàn áp của tinh tinh đầu đàn, những con tinh tinh […]
Th2
mình xin giá đặt hàng primer với ạ