Đặt hàng primer(mồi) ở đâu?
Đặt hàng primer hay đoạn mồi ở đâu? thời gian đặt primer là bao lâu? Đặt primer ở đâu chất lượng?
Trước tiên cùng tìm hiểu đoạn mồi là gì?
Primer hay đoạn mội là một sợi nucleic acid (hoặc ribonucleic acid) dùng để làm đoạn mồi đúng như cái tên của nó, mồi khởi đầu cho quá trình nhân đôi(replication) của DNA. Hầu hết các enzyme xúc tác quá trình nhân đôi( DNA polymerase ) phải cần primer để bắt đầu tổng hợp một đoạn DNA mới. Vì nó chỉ gắn các nucleotide vào sợi primer có sẵn theo nguyên tắc bổ sung với sợi khuôn.
Hướng dẫn pha loãng primer
Bình thường thì các đoạn primer hoặc probe được nhà sản xuất cung cấp ở dạng đông khô và cần phải pha ra mới sử dụng được, thường pha với nước hoặc các dung dịch đệm.
Các primer thường pha ra ở nồng độ 100 µM hoặc 100 pmol/µl; đó là nồng độ stock. Cần pha loãng ra nồng độ thông thường đó là 10 µM, hoặc nồng độ tùy chỉnh theo quy trình của master mix.
Cần xem trên nhãn của ống primer số nmol là bao nhiêu, rồi đem nhân cho 10, kết quả thu được chính là thể tích (µl) nước hoặc dung dịch đệm sử dụng cho hoàn nguyên primer/probe để đạt được nồng độ là 100 µM.
Ví dụ như trên nhãn ống primer là 30.0 nmol thì lúc này mình chỉ cần bổ sung thêm 300 µl nước hoặc dung dịch đệm. Nồng độ ống primer lúc này là 100 µM.
Các bước pha loãng primer như sau
- Cho vào máy ly tâm ở 5000 vòng/phút trong 1-2 phút để các chất trên nắp hoặc thành ống kéo xuống bên dưới đáy ống primer.
- Bổ sung thể tích nước hoặc dung dịch đệm đúng theo thể tích đã hướng dẫn tính toán ở trên (thể tích = 10 x số nmol). Dung dịch đệm TE 1X (10 mM Tris và 1 mM EDTA) sẽ được đề xuất sử dụng để giúp bảo quản primer/probe được lâu hơn.
- Tiếp theo đem đi vortex đề hòa tan viên đông khô, rồi đem đi ủ ở 55oC trong 1-5 phút cho nó tan ra hết.
- Chia nhỏ primer/probe vào các ống(tube) 1,5ml. Thể tích chia nhỏ phụ thuộc vào số lượng phản ứng sử dụng, có thể chia nhỏ khoảng 20µl hoặc nhiều hơn.
- Những tube này bảo quản ở -20oC sẽ lưu trữ được lâu ( 1 năm)
Công thức pha loãng về nồng độ sử dụng
Công thức sử dụng :C1 x V1 = C2 x V2
Ví dụ: Nồng độ ban đầu là C1 (10 µM), V1 là thể tích ống gốc cần hút. C2 là nồng độ sử dụng (ví dụ 1 µM), V2 là thể tích của ống sử dụng cần pha (ví dụ 50 µL). Do đó, V1= (1*50)/10 = 5 µL
Do đó, chúng ta cần hút 5 µl của ống gốc nồng độ 10 µM và bổ sung thêm 45 µl nước để được ống nồng độ sử dụng 1 µM có thể tích 50 µl.
Thời gian đặt hàng primer
Chúng tôi sẽ ghép các đơn hàng nhỏ theo yêu cầu của khách hàng. Khi đủ số lượng sẽ tiến hành gửi đơn qua hãng để tổng hợp theo trình tự của khách hàng đưa ra. Thời gian đặt hàng thông thường từ 4-6 tuần.
Acid mạnh nhất Thế giới (Fluoroantimonic acid)
Acid mạnh nhất Thế giới Fluoroantimonic acid ( hãng […]
Th1
[Thuyết minh] Cuộc chiến kinh hoàng giữa bầy kiến và tổ mối
Cuộc chiến nãy lửa giữa bầy kiến và đàn […]
Th3
Nhện đầu chó, loài nhện kỳ lạ nhất hành tinh
Điều khiến nhện trở nên đặc biệt tới mức kỳ quái chính là phần thân […]
Th6
Rái cá mẹ liều mình cứu con giữa đàn sói
Rái cá mẹ liều mình xông vào giữa đàn sói, nhằm phân tán sự chú […]
Cây ăn thịt nhanh nhất Thế giới
Cây rong bladderwort tạo ra những chiếc bẫy có lực hút mạnh gấp 600 lần […]
Th2
Chấy lây từ người này sang người khác như thế nào
Con chấy hay chí di chuyển bằng cách bò trên cọng tóc. Nó đẻ trứng […]
Th7
Vì sao HIV khó chữa đến vậy?
Vào năm 2008 , một chuyện hy hữu đã xảy ra: một người đàn ông […]
Th7
Đậu nành trở thành siêu thực phẩm
Với hàm lượng protein cùng chất béo cao và nhiều ứng dụng trong chế biến, […]
Th3
mình xin giá đặt hàng primer với ạ